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番茄2個ERF-B1亞族轉(zhuǎn)錄因子基因的克隆及其對生物和非生物脅迫響應
關(guān)鍵詞：番茄 轉(zhuǎn)錄因子 乙烯反應元件結(jié)合蛋白 生物和非生物脅迫 酵母單雜交
摘要：為進一步研究番茄ERF轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控植物抗逆的分子機理,本研究以番茄浙雜-301為試驗材料,分別克隆獲得2個乙烯反應元件結(jié)合蛋白基因SlERF83和SlERF109,并對其進行序列及表達分析。結(jié)果表明,番茄SlERF83和SlERF109基因分別含有678 bp和669 bp的開放閱讀框,編碼225和222個氨基酸,各含有1個保守的AP2結(jié)構(gòu)域,屬于親水性蛋白。進化分析表明,這2個ERF轉(zhuǎn)錄因子均屬于AP2/ERF家族中ERF亞族的B1組。SlERF83和SlERF109三級結(jié)構(gòu)都含有1個α-螺旋和3個β-折疊。酵母單雜交及β-半乳糖苷酶活性測定結(jié)果證明SlERF83轉(zhuǎn)錄因子可以與GCC-box結(jié)合。番茄2個ERF蛋白啟動子含有多種逆境相關(guān)的順式作用元件。采用熒光定量PCR檢測SlERF83和SlERF109在非生物和生物脅迫下的表達,結(jié)果表明,高鹽和干旱脅迫下,SlERF83和SlERF109基因的表達均被抑制;水楊酸處理能夠誘導SlERF83和SlERF109基因的表達;茉莉酸甲酯處理下SlERF83表達水平提高,SlERF109表達量降低;番茄黃化曲葉病毒侵染下,SlERF83和SlERF109基因的表達均被抑制。SlERF83和SlERF109轉(zhuǎn)錄因子可能參與了番茄對生物及非生物脅迫的響應過程。本研究結(jié)果為進一步深入開展ERF轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控番茄抗逆分子機制研究提供了一定的理論依據(jù)。
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