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Spexin轉基因小鼠的構建及表型初步分析
關鍵詞：spexin piggybac 轉基因小鼠 糖耐受
摘要：Spexin是一種具有多種生物學功能的神經肽,在代謝疾病及神經系統疾病中發揮重要作用.為了深入研究spexin的生理功能和相關機制,構建了spexin轉基因小鼠,通過檢測血液中spexin含量以及糖耐受實驗,對模型小鼠進行了初步的表型分析.利用piggyBac(PB)轉座子技術培育spexin轉基因小鼠,采用聚合酶鏈反應(polymerase chain reaction,PCR)和酶聯免疫吸附測定法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)分別在基因層面和蛋白層面驗證了模型動物是否構建成功.之后用飼喂高脂飼料的雄性小鼠進行糖耐受實驗,對轉基因模型小鼠進行表型分析.PCR結果顯示,以靶向spexin的兩對引物擴增,轉基因型小鼠基因組DNA中能分別擴增出300 bp和301 bp的片段,而野生型小鼠則不能.ELISA結果中,轉基因型小鼠血清中spexin含量較野生型小鼠顯著升高;同一表型中,雌雄小鼠間血清中spexin水平無明顯差異.飼喂高脂飼料85 d內,轉基因型小鼠和野生型小鼠體重變化未觀察到顯著差異;糖耐受結果顯示,轉基因型小鼠每個時間點血糖濃度均低于野生型小鼠,且在15 min時具有顯著性差異.結果顯示成功構建了過表達spexin基因的小鼠模型.spexin表達水平的升高在一定程度上提高了C57BL/6小鼠的糖耐受能力.該模型為進一步研究spexin基因在動物體內的功能以及在代謝疾病發病機制中的作用奠定了基礎.
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