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熊貓?jiān)赐僖喝闂U菌的分離鑒定及部分生物學(xué)特性分析
關(guān)鍵詞：大熊貓 抗生素 益生菌 唾液乳桿菌
摘要：本研究旨在分離大熊貓腸道內(nèi)唾液乳桿菌,為獲得抑菌效果好,適應(yīng)性強(qiáng)的熊貓?jiān)慈樗峋Ｍㄟ^選取健康大熊貓新鮮糞便,利用MRS培養(yǎng)基進(jìn)行厭氧培養(yǎng)和單克隆純化,通過形態(tài)學(xué)、生理生化鑒定、16S rDNA基因序列測(cè)定及同源性分析篩選到10株唾液乳桿菌。采用牛津杯法、活菌計(jì)數(shù)法、藥敏紙片法( K-B法)和PCR技術(shù)對(duì)分離菌株作進(jìn)一步的耐受性、抑菌性和耐藥性分析。結(jié)果表明:ZM02、ZZ03菌株在pH2.0的條件下培養(yǎng)2 h有76.62%、80.75%的存活率;在膽鹽濃度為0.3%的條件下培養(yǎng)2 h有97.76%、99%的存活率。抑菌試驗(yàn)結(jié)果表明:大腸桿菌抑菌效果最佳為ZM01 ( 10.45±0.43 ) mm;乙型副傷寒沙門氏菌抑菌效果最佳為ZZ03 ( 12.58±0.24 ) mm;銅綠假單胞菌抑菌效果最佳為ZZ04 ( 13.99±0.29 ) mm;金黃色葡萄球菌抑菌效果最佳為ZM06 ( 16.85±0.32 ) mm。耐藥基因檢測(cè)結(jié)果表明26對(duì)耐藥基因僅有ZM02菌株未檢測(cè)含有耐藥基因。藥敏實(shí)驗(yàn)表明:分離菌株對(duì)青霉素類(盤尼西林除外)、其他抗生素類(呋喃妥因、亞胺培南)和氯霉素類均無耐藥。綜上所述,本研究從大熊貓新鮮糞便中分離鑒定得到10株唾液乳酸桿菌并從中篩選到一株生物特性好、抑菌效果明顯、不含耐藥基因的唾液乳桿菌-編號(hào)103并命名ZM02。該研究可為后續(xù)熊貓?jiān)次⑸鷳B(tài)制劑提供發(fā)展空間。
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