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鹿流行性出血熱病毒實(shí)時(shí)熒光RT-RPA檢測(cè)方法的建立
關(guān)鍵詞：鹿流行性出血熱病毒 快速檢測(cè)
摘要：為建立一種快速檢測(cè)鹿流行性出血熱病毒(EHDV)的實(shí)時(shí)熒光RT-RPA檢測(cè)方法,本研究根據(jù)EHDV保守的非結(jié)構(gòu)蛋白NS1基因(segment 5)設(shè)計(jì)特異性引物和探針,建立了敏感、快速的EHDV核酸實(shí)時(shí)熒光RT-RPA檢測(cè)方法。結(jié)果顯示,該方法特異性強(qiáng),能準(zhǔn)確檢測(cè)EHDV核酸,與藍(lán)舌病病毒(BTV)、牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)、口蹄疫病毒(FMDV)等病原核酸無(wú)交叉反應(yīng);敏感性高,本試驗(yàn)中最低可檢測(cè)到8×10~1copies/μL;檢測(cè)時(shí)間短,僅需15 min;重復(fù)性好。采用所建立方法對(duì)115份樣品進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果與OIE推薦的實(shí)時(shí)熒光RT-PCR法檢測(cè)結(jié)果相同。上述結(jié)果表明,本研究建立的實(shí)時(shí)熒光RT-RPA快速檢測(cè)法操作簡(jiǎn)便,可用于基層實(shí)驗(yàn)室快速檢測(cè)。
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