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p38絲裂原活化蛋白激酶對(duì)人乳牙牙髓干細(xì)胞成骨分化能力的影響
關(guān)鍵詞：乳牙牙髓干細(xì)胞 牙髓干細(xì)胞 p38絲裂原活化蛋白激酶 成骨分化
摘要：目的:比較人乳牙牙髓干細(xì)胞(SHED)及牙髓干細(xì)胞(DPSC)增殖及成骨分化能力差異,探討p38絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)在人乳牙牙髓干細(xì)胞及牙髓干細(xì)胞中的表達(dá)及對(duì)干細(xì)胞成骨分化能力的影響。方法:有限稀釋法分離培養(yǎng)SHED和DPSC,ELISA法檢測(cè)IL-1β、TNF-α分泌水平;PCR檢測(cè)PCNA及CCND-1表達(dá);兩種干細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)及成骨誘導(dǎo)7d后進(jìn)行ALP染色、實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)Runx2、OCN基因表達(dá)。采用Western blot檢測(cè)兩種細(xì)胞成骨誘導(dǎo)7d后p38及磷酸化p38(p-p38)的表達(dá)。使用p38 MAPK特異性抑制劑SB203580干擾后Western blot驗(yàn)證抑制效果;在SB203580干擾后流式細(xì)胞儀檢測(cè)兩種細(xì)胞周期變化,Western blot檢測(cè)細(xì)胞OCN、ALP表達(dá)。結(jié)果:SH ED的PCNA、CCND-1、Runx 2、OCN表達(dá)水平高于DPSC。SH ED的p38表達(dá)量高于DPSC;成骨誘導(dǎo)后兩種PDLSCs中的p-p38表達(dá)均升高,但p38表達(dá)水平有所降低。SB203580干擾后SHED的增殖指數(shù)及OCN和ALP表達(dá)水平顯著降低。結(jié)論:SHED的增殖能力及成骨分化能力高于DPSC,p38 MAPK在調(diào)控SH ED的生物學(xué)功能中發(fā)揮重要作用,抑制p38后SH ED的增殖及成骨分化能力也被顯著抑制。
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